ٹرپسن کے لیے ایلیسا کٹ

Recombinant Trypsin اکثر بائیو فارماسیوٹیکل مینوفیکچرنگ میں استعمال کیا جاتا ہے - سیل کی تیاری کے دوران یا مصنوعات کی ترمیم اور فعال کرنے کے لیے۔ٹرپسن حفاظتی خطرات لاحق ہے اور اس لیے حتمی مصنوعات کی ریلیز سے پہلے اسے ہٹا دینا چاہیے۔یہ سینڈوچ کٹ سیل کلچر سپرنٹنٹ میں بقایا ٹرپسن کی مقداری پیمائش اور بائیو فارماسیوٹیکل مینوفیکچرنگ میں دیگر طریقہ کار کے لیے ہے جب ٹرپسن استعمال کیا جاتا ہے۔

یہ کٹ ایک Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) ہے۔پلیٹ کو پورسین ٹرپسن اینٹی باڈی کے ساتھ پہلے سے لیپت کیا گیا ہے۔نمونے میں موجود ٹرپسن کو شامل کیا جاتا ہے اور کنویں پر لیپت اینٹی باڈیز سے منسلک ہوتا ہے۔اور پھر بایوٹینیلیٹڈ پورسین ٹرپسن اینٹی باڈی شامل کی جاتی ہے اور نمونے میں ٹرپسن سے منسلک ہوتی ہے۔دھونے کے بعد، HRP-Streptavidin شامل کیا جاتا ہے اور Biotinylated trypsin antibody سے منسلک ہوتا ہے۔انکیوبیشن کے بعد انباؤنڈ HRP-Streptavidin دھل جاتا ہے۔پھر TMB سبسٹریٹ محلول کو HRP کے ذریعے شامل کیا جاتا ہے اور ایک نیلے رنگ کی پروڈکٹ تیار کرنے کے لیے کیٹالائز کیا جاتا ہے جو تیزابی سٹاپ محلول شامل کرنے کے بعد پیلے رنگ میں تبدیل ہو جاتا ہے۔پیلے رنگ کی کثافت ٹرپسن کی ہدف کی مقدار کے متناسب ہے۔
نمونہ پلیٹ میں پکڑا گیا۔جذب 450 nm پر ماپا جاتا ہے۔