ملٹی پلیکس ون سٹیپ RT-qPCR پریمکس
تفصیل
بلی نمبر: HCR5141A
ملٹی پلیکس ون سٹیپ RT-qPCR پریمکس ایک ملٹی پلیکس مقداری پی سی آر کٹ ہے جو آر این اے پر بطور ٹیمپلیٹ ہے۔تجربے میں، ریورس ٹرانسکرپشن اور مقداری پی سی آر ایک ہی ری ایکشن ٹیوب میں کیے جاتے ہیں، تجرباتی آپریشن کو آسان بناتے ہوئے اور آلودگی کے خطرے کو کم کرتے ہیں۔بفر اور انزائم مکس کا منفرد ڈیزائن ون سٹیپ لائو فلائزڈ سسٹم میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔یہ کٹ گرمی سے بچنے والے ریورس ٹرانسکرپٹیس کو استعمال کرتی ہے جو مقداری امپلیفیکیشن کے لیے ہاٹ سٹارٹ Taq DNA پولیمریز کا استعمال کرتے ہوئے پہلے اسٹرینڈ cDNA کی موثر ترکیب کے لیے کرتی ہے۔اس میں آپٹمائزڈ ری ایکشن بفر، انزائمز مکس وغیرہ شامل ہیں، اور ایسے عوامل جو مؤثر طریقے سے غیر مخصوص پی سی آر ایمپلیفیکیشن کو روکتے ہیں اور متعدد کیو پی سی آر ری ایکشنز کی ایمپلیفیکیشن افادیت کو بڑھاتے ہیں، پرائمر کی ایمپلیفیکیشن افادیت کو یقینی بناتے ہوئے ایک سے زیادہ فلوروسینس مقداری امپلیفیکیشن کو فعال کرتے ہیں۔
اجزاء
نام |
1. لیو بفر |
2. Lyo-Enzyme مکس |
3. لیو محافظ |
نقل و حمل کی حالتآئن
A: لائو بفر اور محافظ: -25~-15℃، شیلف لائف 1 سال ہے۔
B: لائو انزائم مکس، 2-8 ℃، شیلف لائف 6 ماہ ہے۔
آپریشن کے لیے ہدایات
1. رد عمل کا نظام (مثال کے طور پر 25μL لیں)
اجزاء | حجم (μL) | حتمی ارتکاز |
لیو بفر | 6 | 1* |
لیو انزائم مکس | 1 | - |
لیو پروٹیکٹنٹ | 8 | - |
پرائمر مکس (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
پروب مکس (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
آر این اے ٹیمپلیٹ | 5 | - |
DEPC H2O | 25 تک | - |
2. آپٹمائزڈ سائیکلنگ پروٹوکول
1) معیاری سائیکلنگ پروٹوکول
رد عمل کا مرحلہ | درجہ حرارت | وقت | سائیکل | |
1 | ریورس ٹرانسکرپشن | 50°Ca | 10 منٹ | 1 |
2 | ابتدائی ڈینیچریشن | 95°C | 5 منٹ | 1 |
3 | ایمپلیفیکیشن رد عمل | 95°C | 15 سیکنڈ | 45 سائیکل |
60°Cb | 30 سیکنڈc |
2) فاسٹ سائیکلنگ پروٹوکول
| رد عمل کا مرحلہ | درجہ حرارت | وقت | سائیکل |
1 | ریورس ٹرانسکرپشن | 50°Ca | 2 منٹ | 1 |
2 | ابتدائی ڈینیچریشن | 95°C | 2 سیکنڈ | 1 |
3 | ایمپلیفیکیشن رد عمل | 95°C | 1 سیکنڈ |
45 سائیکل |
60°Cb | 13 سیکنڈc |
نوٹ:
a) معکوس نقل: درجہ حرارت 10-15 منٹ کے لیے 42°C یا 50°C کا انتخاب کر سکتا ہے۔
b) ایمپلیفیکیشن رد عمل: درجہ حرارت کو ڈیزائن کردہ پرائمر کی Tm قدر کے مطابق ایڈجسٹ کیا جاتا ہے۔
ج)فلوروسینس سگنل حصول: براہ کرم تجرباتی طریقہ کار کی ضروریات کے مطابق ترتیب دیں۔آلہ دستی.
تکنیکی معلومات / تفصیلات
ہاٹ سٹارٹ | بلٹ میں گرم آغاز |
پتہ لگانے کا طریقہ | پرائمر پروب کا پتہ لگانا |
پی سی آر کا طریقہ | ایک قدم RT-qPCR |
نمونے کی قسم | آر این اے |
نوٹس
1. یہ پروڈکٹ صرف تحقیقی استعمال کے لیے ہے۔
2. اپنی صحت اور حفاظت کو یقینی بنانے کے لیے براہ کرم ضروری PPE، جیسا کہ لیب کوٹ اور دستانے پہنیں!