درجہ حرارت حساس UNG

درجہ حرارت حساس UNG (TS-UNG) E. coli میں ریکومبیننٹ اظہار کے ذریعہ حاصل کیا جاتا ہے۔ینجائم یوریسل پر مشتمل سنگل اور ڈبل پھنسے ہوئے ڈی این اے سے مفت یورایل کی رہائی کو متحرک کرتا ہے اور آر این اے کے خلاف غیر فعال ہے۔E. کولی جین کی اصل کے روایتی UNG انزائم کے مقابلے میں، TS-UNG انزائم کم درجہ حرارت (20℃~37℃) پر زیادہ سرگرمی رکھتا ہے اور درجہ حرارت سے حساس اور آسانی سے غیر فعال (50℃) ہوتا ہے، جس سے dUTP پر مشتمل امپلیفیکیشن کے انحطاط سے بچا جاتا ہے۔ کمرے کے درجہ حرارت پر بقایا سرگرمی کے ذریعہ مصنوعات جو روایتی UNG انزائم کے غیر فعال ہونے کے بعد رہ سکتی ہیں۔لہذا، TS-UNG انزائم نہ صرف PCR آلودگی سے بچاؤ کے رد عمل کے لیے موزوں ہے، بلکہ RT-PCR ایمپلیفیکیشن پروگرام سے بھی اچھی طرح میل کھاتا ہے اور اسے RT-PCR آلودگی سے بچاؤ کے رد عمل میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔

تجویز کردہ درخواست

آلودگی کی روک تھام پروردن

اسٹوریج کی حالت

طویل مدتی اسٹوریج کے لیے -20 ° C، استعمال سے پہلے اچھی طرح مکس ہونا چاہیے، بار بار جمنے سے گریز کریں۔

اسٹوریج بفر

20 mM Tris-HCl (pH 7.5)، 100 mM NaCl، 0.1 mM EDTA، 1 mM DTT، سٹیبلائزر، 50% گلیسرول۔

یونٹ کی تعریف

37°C پر 1 گھنٹہ میں 1µg سنگل اسٹرینڈڈ DNA کو کم کرنے کے لیے درکار انزائم کی مقدار 1 یونٹ سرگرمی (U) ہے۔

کوالٹی کنٹرول

1.SDS-PAGE الیکٹروفوریٹک طہارت 98% سے زیادہ

2.انحطاط کی سرگرمی، بیچ ٹو بیچ کنٹرول، استحکام

3.کوئی خارجی نیوکلیز سرگرمی نہیں، کوئی خارجی اینڈونکلیز یا ایکزونوکلیز آلودگی نہیں۔

ہدایات

نوٹ: a: اگر qPCR/qRT-PCR کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، تو فلوروسینٹ پروب کو ری ایکشن سسٹم میں شامل کیا جانا چاہیے۔عام طور پر، 0.2 μM کا حتمی پرائمر ارتکاز اچھے نتائج دے سکتا ہے۔جب رد عمل کی کارکردگی خراب ہوتی ہے تو، پرائمر کی حراستی کو 0.2-1 μM کی حد میں ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے۔عام طور پر، تحقیقاتی ارتکاز کو 0.1-0.3 μM کی حد میں بہتر بنایا جاتا ہے۔پرائمر اور پروب کے بہترین امتزاج کو تلاش کرنے کے لیے ارتکاز کے تدریجی تجربات کیے جا سکتے ہیں۔

نوٹس

1.TS-UNG انزائم کا بہترین ردعمل کا درجہ حرارت نسبتاً کم ہے، اور اسے 20℃~37℃ کی حد میں بہتر بنایا جا سکتا ہے، انزائم کی خوراک اور رد عمل کا وقت 0.1~0.5U، 5~ کی حد میں بہتر کیا جا سکتا ہے۔ 10 منٹ؛اور انزائم کو ریورس ٹرانسکرپشن کے عمل میں غیر فعال کیا جا سکتا ہے۔

2.آلودگی کو روکنے کے لیے یہ PCR اور RT-PCR کے لیے موزوں ہے۔

3.بار بار منجمد پگھلنے سے گریز کریں، اور درجہ حرارت کے بڑے اتار چڑھاو کا سامنا نہ کریں۔

4.مختلف جینز جن کو بڑھایا جانا ہے ان میں dUTP کی مختلف استعمال کی کارکردگی اور UNG انزائم کی حساسیت ہوتی ہے، لہذا، اگر UNG سسٹم کے استعمال سے پتہ لگانے کی حساسیت میں کمی واقع ہوتی ہے، تو رد عمل کے نظام کو ایڈجسٹ اور بہتر بنایا جانا چاہیے، اگر آپ کو تکنیکی مدد کی ضرورت ہو، تو براہ کرم رابطہ کریں۔ ہماری کمپنی.