One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
بلی نمبر: HCR5143A
ون سٹیپ RT-qPCR پروب کٹ (فوراً) ایک پروب پر مبنی RT-qPCR فاسٹ ڈیٹیکشن کٹ ہے جو سنگل پلیکس یا ملٹی پلیکس مقداری PCR کے لیے موزوں ہے جو RNA کو بطور ٹیمپلیٹ (جیسے RNA وائرس) استعمال کرتی ہے۔یہ پروڈکٹ اینٹی باڈی میں ترمیم شدہ Taq DNA Polymerase کی ایک نئی نسل اور ایک قدم کے وقف شدہ ریورس ٹرانسکرپٹیس کا استعمال کرتی ہے، جس میں تیز رفتار امپلیفیکیشن کے لیے ایک بہترین بفر ہوتا ہے، جس میں تیز تر ایمپلیفیکیشن کی رفتار، اعلی امپلیفیکیشن کی کارکردگی اور مخصوصیت ہوتی ہے۔یہ تھوڑے وقت میں کم اور زیادہ ارتکاز کے نمونوں کے سنگل پلیکس اور ملٹی پلیکس دونوں میں متوازن پرورش کی حمایت کرتا ہے۔
اجزاء
1. 5×RT-qPCR بفر (U+)
2. انزائم مکس (U+)
نوٹس:
a5×RT-qPCR بفر (U+) میں dNTP اور Mg شامل ہیں۔2+;
بانزائم مکس (U+) میں ریورس ٹرانسکرپٹیس، ہاٹ سٹارٹ ٹاک ڈی این اے پولیمریز، آر نیس انحیبیٹر اور یو ڈی جی شامل ہیں۔
cRNase فری ٹپس، EP ٹیوب وغیرہ استعمال کریں۔
استعمال کرنے سے پہلے، 5×RT-qPCR بفر (U+) کو اچھی طرح مکس کریں۔اگر پگھلنے کے بعد کوئی بارش ہو تو، بفر کے کمرے کے درجہ حرارت پر واپس آنے کا انتظار کریں، مکس اور تحلیل ہو جائیں، اور پھر انہیں عام طور پر استعمال کریں۔
ذخیرہ کرنے کی شرائط
پروڈکٹ کو خشک برف کے ساتھ بھیج دیا جاتا ہے اور اسے 1 سال کے لیے -25~-15℃ پر اسٹور کیا جا سکتا ہے۔
ہدایات
1. رد عمل سسٹم
| اجزاء | حجم (20 μL ردعمل) |
| 2 ×RT-qPCR بفر | 4μL |
| انزائم مکس (U+) | 0.8μL |
| پرائمر فارورڈ | 0.1~ 1.0μM |
| پرائمر ریورس | 0.1~ 1.0μM |
| تقمان تحقیقات | 0.05~0.25μM |
| سانچے | X μL |
| RNase فری پانی | 25μL تک |
نوٹ: رد عمل کا حجم 10-50μL ہے۔
2. سائیکلنگ پروٹوکول (Sتندرست)
| سائیکل قدم | درجہ حرارت | وقت | سائیکل |
| ریورس ٹرانسکرپشن | 55 ℃ | 10 منٹ | 1 |
| ابتدائی ڈینیچریشن | 95 ℃ | 30 سیکنڈ | 1 |
| ڈینیچریشن | 95 ℃ | 10 سیکنڈ | 45 |
| اینیلنگ/توسیع | 60 ℃ | 30 سیکنڈ |
| سائیکلنگ پروٹوکول (تیز) سائیکل قدم |
درجہ حرارت |
وقت |
سائیکل |
| ریورس ٹرانسکرپشن | 55 ℃ | 5 منٹ | 1 |
| ابتدائی ڈینیچریشن | 95 ℃ | 5 سیکنڈ | 1 |
| ڈینیچریشن | 95 ℃ | 3 سیکنڈ | 43 |
| اینیلنگ/توسیع | 60 ℃ | 10 سیکنڈ |
نوٹس:
aریورس ٹرانسکرپشن کا درجہ حرارت 50 ℃ سے 60 ℃ کے درمیان ہے، درجہ حرارت میں اضافہ پیچیدہ ڈھانچے اور اعلی CG مواد کے سانچوں کو بڑھانے میں مدد کرتا ہے۔
ببہترین اینیلنگ درجہ حرارت کو پرائمر کی Tm قدر کی بنیاد پر ایڈجسٹ کرنے کی ضرورت ہے، اور ریئل ٹائم پی سی آر آلے کی بنیاد پر فلوروسینس سگنل جمع کرنے کے لیے کم سے کم وقت کا انتخاب کریں۔
نوٹس
براہ کرم اپنی صحت اور حفاظت کو یقینی بنانے کے لیے ضروری PPE، جیسا کہ لیب کوٹ اور دستانے پہنیں!
