Robustart Taq DNA پولیمریز

Robustart Taq DNA Polymerase ایک گرم آغاز DNA پولیمریز ہے۔یہ پراڈکٹ نہ صرف PCR سسٹم کی تیاری اور امپلیفیکیشن کے عمل میں پرائمر کی غیر مخصوص اینیلنگ یا پرائمر ایگریگیشن کی وجہ سے پیدا ہونے والے غیر مخصوص ردعمل کو بہتر طور پر روک نہیں سکتی۔لہذا، اس کی بہترین خصوصیت ہے اور یہ کم ارتکاز کے سانچوں کو بڑھانے کے لیے زیادہ موثر ہے، اور یہ ملٹی پلیکسڈ پی سی آر ایمپلیفیکیشن ری ایکشن کے لیے موزوں ہے۔مزید یہ کہ، اس پروڈکٹ میں بہت اچھی قابل اطلاق ہے، اور پی سی آر کے مختلف قسم کے رد عمل میں مستحکم امپلیفیکیشن نتائج حاصل کیے جا سکتے ہیں۔

اجزاء

1.5 U/μL Robustart Taq DNA پولیمریز

2.10 × PCR بفر II (Mg²+ مفت) (اختیاری)

3.25 ایم ایم ایم جی سی ایل₂(اختیاری)

* 10 × PCR بفر II (Mg²+ مفت) dNTP اور Mg²+ پر مشتمل نہیں ہے، براہ کرم dNTPs اور MgCl شامل کریں₂رد عمل کا نظام تیار کرتے وقت۔

تجویز کردہ درخواستیں

1.فاسٹ ایمپلیفیکیشن۔

2.متعدد پرورش۔

3.خون، جھاڑو اور دیگر نمونوں کی براہ راست پرورش۔

4.سانس کی بیماریوں کا پتہ لگانا۔

اسٹوریج کی حالت

طویل مدتی اسٹوریج کے لیے -20 ° C، استعمال سے پہلے اچھی طرح مکس ہونا چاہیے، بار بار جمنے سے گریز کریں۔

*اگر ریفریجریشن کے بعد بارش ہوتی ہے تو یہ معمول کی بات ہے۔اختلاط اور استعمال سے پہلے کمرے کے درجہ حرارت کو متوازن کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔

یونٹ کی تعریف

ایک فعال یونٹ (U) کو انزائم کی مقدار کے طور پر بیان کیا جاتا ہے جو 74°C پر تیزاب میں حل نہ ہونے والے مواد میں 10 nmol deoxyribonucleotide کو 30 منٹ کے لیے چالو سالمن سپرم DNA کو ٹیمپلیٹ/پرائمر کے طور پر استعمال کرتا ہے۔

کوالٹی کنٹرول

1.SDS-PAGE الیکٹروفوریٹک طہارت 98% سے زیادہ ہے۔

2.ایمپلیفیکیشن حساسیت، بیچ ٹو بیچ کنٹرول، استحکام۔

3.کوئی خارجی نیوکلیز سرگرمی نہیں، کوئی خارجی اینڈونکلیز یا ایکزونوکلیز آلودگی نہیں

ہدایات

ری ایکشن سیٹ اپ

نوٹس:

1) ایکبفر میں dNTP اور Mg²+ شامل نہیں ہے، براہ کرم dNTPs اور MgCl شامل کریں₂رد عمل کا نظام تیار کرتے وقت۔

2) ب۔اگر qPCR/qRT-PCR کے لیے استعمال کیا جاتا ہے تو، فلوروسینٹ پروبس کو رد عمل کے نظام میں شامل کیا جانا چاہیے۔عام طور پر، 0.2 μM کا حتمی پرائمر ارتکاز اچھے نتائج دے گا۔اگر رد عمل کی کارکردگی خراب ہے تو، پرائمر کی حراستی کو 0.2-1 μM کی حد میں ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے۔تحقیقات کا ارتکاز عام طور پر 0.1-0.3 μM کی حد میں بہتر کیا جاتا ہے۔پرائمر اور پروب کے بہترین امتزاج کو تلاش کرنے کے لیے ارتکاز کے تدریجی تجربات کیے جا سکتے ہیں۔

تھرمل سائیکلنگ پروٹوکول

نوٹس

1.تیز ڈی این اے پولیمریز کی افزائش کی شرح 1 kb/10 s سے کم نہیں ہونی چاہیے۔مختلف پی سی آر آلات کے درجہ حرارت میں اضافے اور گرنے کی شرح، درجہ حرارت کنٹرول موڈ اور حرارت کی ترسیل کی کارکردگی بہت مختلف ہوتی ہے، اس لیے مخصوص تیز رفتار پی سی آر آلے کے لیے بہترین ردعمل کے حالات کو بہتر بنانے کی سفارش کی جاتی ہے۔

2.یہ نظام اعلیٰ خصوصیت اور حساسیت کے ساتھ انتہائی موافقت پذیر ہے۔

3.اعلی حساسیت پی سی آر کا پتہ لگانے والے ری ایجنٹ کے طور پر استعمال کے لیے موزوں ہے، اور ملٹی پلیکس پی سی آر ایمپلیفیکیشن ری ایکشن میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔

4.5′→3′ پولیمریز سرگرمی، 5′→3′ exonuclease سرگرمی؛کوئی 3′→5′ exonuclease سرگرمی؛پروف ریڈنگ کا کوئی فنکشن نہیں۔

5.PCR اور RT-PCR کی کوالٹیٹیو اور مقداری جانچ کے لیے موزوں ہے۔

6.پی سی آر پروڈکٹ کا 3′ اختتام A ہے، جسے براہ راست ٹی ویکٹر میں کلون کیا جا سکتا ہے۔

7.کم اینیلنگ درجہ حرارت والے پرائمر کے لیے یا 200 bp سے زیادہ لمبے ٹکڑوں کو بڑھانے کے لیے تین قدمی طریقہ تجویز کیا جاتا ہے۔