الٹرا نیوکلیز جی ایم پی گریڈ
بلی نمبر: HC2016A
الٹرا نیوکلیز GMP گریڈ کو Escherichia coli (E.coli) میں جینیاتی طور پر انجینئرڈ اور GMP ماحول کے تحت تیار کرکے ظاہر اور صاف کیا جاتا ہے۔یہ سائنسی تحقیق میں سیل سپرنٹنٹ اور سیل لیسیٹ کی viscosity کو کم کر سکتا ہے، پروٹین صاف کرنے کی کارکردگی کو بڑھا سکتا ہے اور پروٹین کی فنکشنل ریسرچ کو بڑھا سکتا ہے۔پروڈکٹ میزبان نیوکلک ایسڈ کی باقیات کو پی جی گریڈ تک کم کر سکتی ہے، جس سے ایپلی کیشنز کی حیاتیاتی مصنوعات کی کارکردگی اور حفاظت کو بہتر بنایا جا سکتا ہے جس میں وائرس صاف کرنے، ویکسین کی تیاری، اور پروٹین/پولی سیکرائیڈ فارماسیوٹیکل مینوفیکچرنگ شامل ہیں۔اس کے علاوہ، پروڈکٹ کو سیل تھراپی اور ویکسین کی نشوونما میں انسانی پیریفرل بلڈ مونو نیوکلیئر سیلز (PBMC) کے کلمپنگ کو روکنے کے لیے بھی لاگو کیا جا سکتا ہے۔
الٹرا نیوکلیز ایک جراثیم سے پاک ریجنٹ کی شکل میں فراہم کی جاتی ہے، جو بفر (20mM Tris-HCL pH 8.0، 2mM MgCl، 20 mM NaCl، 50% گلیسرین) میں بے رنگ، شفاف مائع کی ظاہری شکل کے ساتھ فراہم کی جاتی ہے۔یہ پروڈکٹ GMP عمل کی ضروریات کے مطابق تیار کی جاتی ہے اور مائع شکل میں فراہم کی جاتی ہے۔
اجزاء
الٹرا نیوکلیز GMP گریڈ (250 U/μL)
ذخیرہ کرنے کی شرائط
پروڈکٹ کو خشک برف کے ساتھ بھیجا جاتا ہے اور اسے -25℃~-15°C پر دو سال تک محفوظ کیا جا سکتا ہے۔
اگر پروڈکٹ کو کھولا جاتا ہے اور ایک ہفتے سے زیادہ 4℃ پر محفوظ کیا جاتا ہے، تو ہم فلٹر کرنے کی تجویز کرتے ہیں۔مائکروبیل آلودگی کو روکنے کے لئے مصنوعات.
وضاحتیں
| اظہار میزبان | الٹرا نیوکلیز جین کے ساتھ ریکومبیننٹ ای کولی |
| سالماتی وزن | 26.5 kDa |
| soelectric نقطہ | 6.85 |
| طہارت | ≥99% (SDS-PAGE) |
| اسٹوریج بفر | 20mM Tris-HCL pH 8.0، 2mM MgCl، 20 mM NaCl، 50% گلیسرین |
|
یونٹ کی تعریف | ایک سرگرمی یونٹ (U) کی تعریف انزائم کی مقدار ہے جسے استعمال کیا جاتا ہے۔ΔA260 کی جذب قدر کو 30 منٹ میں 2. 625 ملی لیٹر میں 1.0 سے تبدیل کریں8.0 کے pH کے ساتھ 37℃ پر رد عمل کا نظام (مکمل ہاضمہ کے برابر37 μg سالمن سپرم ڈی این اے اولیگونوکلیوٹائڈس میں)۔ |
ہدایات
1. نمونہ مجموعہ
ملحق خلیات: میڈیم کو ہٹا دیں، خلیات کو PBS سے دھوئیں، اور سپرنٹنٹ کو ہٹا دیں۔
معطلی کے خلیات: سینٹرفیوگریشن کے ذریعے خلیوں کو جمع کریں، خلیات کو PBS سے دھوئیں، 6,000 پر سینٹری فیوج کریں۔10 منٹ کے لیے rpm، گولی جمع کریں۔
Escherichia coli: بیکٹیریا کو سینٹرفیوگریشن کے ذریعے اکٹھا کریں، PBS سے ایک بار دھوئیں، 8000 پر سینٹری فیوج5 منٹ کے لیے rpm، اور گولی جمع کریں۔
2. نمونہ علاج
جمع شدہ سیل چھروں کا لیسیز بفر کے ساتھ ماس(g) سے حجم(mL)1:(10-20) کے تناسب سے علاج کریں، یا برف پر یا کمرے کے درجہ حرارت پر مکینیکل یا کیمیائی طریقوں سے (1 گرام سیل گولی تقریباً
109 خلیات)۔
3. انزائم کا علاج
رد عمل کے نظام میں 1-5mM MgCl شامل کریں اور pH کو 8-9 پر ایڈجسٹ کریں۔
1 گرام سیل چھروں کو ہضم کرنے کے لیے 250 یونٹس کے تناسب کے مطابق الٹرا نیوکلیز شامل کریں، 37 ℃ پر 30 منٹ سے زیادہ تک انکیوبیٹ کریں۔براہ کرم منتخب کرنے کے لیے "تجویز کردہ رد عمل کا وقت" فارم دیکھیںعلاج کی مدت.
4. سپرناٹینٹ مجموعہ
30 منٹ کے لیے 12,000 rpm پر سینٹری فیوج کریں اور سپرنٹنٹ جمع کریں۔
نوٹ: اگر محلول تیزابی یا الکلائن ہے، یا اس میں نمک، صابن، یا زیادہ مقدار میںdenaturants، براہ کرم انزائم کی خوراک میں اضافہ کریں یا اس کے مطابق علاج کا وقت بڑھا دیں۔
تجویز کردہ رد عمل کی شرطons
| پیرامیٹر | بہترین حالت | موثر کنڈیشنر |
| Mg²+Concentration | 1-5 ایم ایم | 1-10 ایم ایم |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| درجہ حرارت | 37℃ | 0-42℃ |
| ڈی ٹی ٹی ارتکاز | 0-100 ایم ایم | >0 ایم ایم |
| Mercaptoethanol ارتکاز | 0-100 ایم ایم | >0 ایم ایم |
| Monovalent Cation ارتکاز | 0-20 ایم ایم | 0-150 ایم ایم |
| فاسفیٹ لون ارتکاز | 0-10 ایم ایم | 0-100 ایم ایم |
تجویز کردہ رد عمل وقت (37℃، 2 mM Mg²+، pH 8.0)
| الٹرا نیوکلیز کی مقدار (حتمی ارتکاز) | ردعمل کا وقت |
| 0.25 U/mL | >10 گھنٹے |
| 2.5 U/mL | >4 گھنٹے |
| 25 U/mL | 30 منٹ |
نوٹس:
براہ کرم اپنی صحت اور حفاظت کو یقینی بنانے کے لیے ضروری PPE، جیسا کہ لیب کوٹ اور دستانے پہنیں!
